外泌体作为一种治疗手段，具有低免疫原性、高靶向性、多功能药物载体能力、穿越生物屏障的能力以及高安全性和稳定性等显著优势。

 

去年 10 月，北京朝阳医院陶勇、中国科学院过程工程研究所魏炜、马光辉院士等在 Nature Biomedical Engineering（IF 29）发表论文。报道了一种新型的「伪细胞」制剂，该制剂基于自愈合微胶囊装载外泌体，可用于治疗多种玻璃体视网膜疾病。这项研究为玻璃体视网膜疾病的治疗提供了一种新的策略，证实了外泌体在眼科疾病治疗中的重要性和潜力。

 

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外泌体研究中，细胞培养过程中的大量血清（FBS）、人血小板裂解物（HPL）、蛋白因子混合物的使用会带来杂蛋白，对所提取的外泌体纯度造成影响，因此杂蛋白的去除是令无数外泌体人为之头疼的痛点之一。从实验设计的角度来说，以 MSC 干细胞外泌体的上游细胞培养为例，如果选择无血清、低蛋白的化学成分确定的培养基，就可以通过减少纯化的步骤来获取更多的外泌体。

 

为何常规培养体系为何会给外泌体研究带来阻碍？

 

体系1. 普通 MSC 细胞培养基+FBS

Fetal Bovine Serum（FBS）一直是细胞培养的首.选，普通MSC细胞培养基配合FBS虽然营养充足，但是对于外泌体研究却面临如下问题：

1）胎牛血清里成分复杂且多，生产工艺和产品质量难以控制；

2）胎牛血清里含量大量牛来源的囊泡，即使超离，也不可能100%去除，严重干扰外泌体纯化；

3）胎牛血清通常含有各种蛋白因子，种类繁多，形成聚体或颗粒，和外泌体大小接近，严重干扰外泌体纯化；

 

体系2. 普通MSC细胞培养基+HPL

Human Platelet Lysate (HPL)相对于FBS，成分没有那么复杂，普通MSC细胞培养基配合HPL培养的工业化培养体系也不在少数，但是仍然面临不少问题：

1）血小板提取物等原材料缺少相应的质量标准，生产工艺和产品质量难以控制；

2）质量标准需要通过参数控制和验证，例如蛋白质、脂质、细胞因子含量和蛋白质组学分析等，但这些成分难以控制，也没有控制标准 ；

3）HPL含有各种蛋白因子，种类繁多，形成聚体或颗粒，和外泌体大小接近，严重干扰外泌体纯化；

 

体系3. 普通MSC细胞培养基+重组蛋白因子混合物

普通MSC细胞培养基+重组蛋白因子混合物是近年来不断优化的一个解决方案，已经无限接近化学成分完全明确了，但是还是有不少的缺点；

1）MSC细胞生长需要各种蛋白因子，种类较多，20种左右，这些蛋白和因子形成聚体或颗粒，和外泌体大小接近，严重干扰外泌体纯化；

2）部分蛋白和因子，即使经过长期细胞培养，也不会降解，严重干扰外泌体纯化；

3）部分蛋白和因子，都是试剂级，内毒素极易超标；

 

适合外泌体研究的培养基有无更优解？

显然，重组蛋白因子混合物虽然已经解决了大部分开发者的需求，但如果可以更进一步，再少一些蛋白种类，就会更加针对性适合外泌体研究。

Umibio 通过潜心研究发现，其实只需要蛋白种类 ≤ 3 种就可以实现外泌体的获取了！众所周知，想要数据准确，一定要选择有文献应用、验证可靠的培养基。Umibio 质量可靠，为你的实验保驾护航～

 

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注意事项：仅适用于 MSC 细胞外泌体生产，不可用于 MSC 细胞传代。