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植物外泌体提取方法参考
人阅读 发布时间：2023-12-22 10:32
一方面PENs是自然产生的，携带来自其母细胞的无害成分，并且其中一些已被证明具有治疗作用；另一方面，更多研究者们也聚焦其作为哺乳动物细胞来源外泌体（Mammalian cell-derived exosomes，MDEs)替代品，以规避MEDs技术的局限性，尤其是在靶向递送系统方面。
PENs的最大优势在于样本容易取得，适合于大规模生产。此外，PENs的生理、化学和生物学特性决定了其高稳定性，可以在体内的某些组织中积累并长期在外周血中循环，结合其低毒性、低免疫原性、高细胞摄取率的等优点，因此在疾病治疗以及作为纳米载体的应用开发中具有巨大的潜力。
PENs和MDEs之间有许多相似之处，但两者仍存在较多差异。MDEs的脂质双层主要由胆固醇、糖苷脂、神经酰胺和磷脂酰丝氨酸组成，它们具有稳定性和独特的刚度。相比之下，PENs的外泌体膜富含磷脂酸（PA）、磷脂酰胆碱（PC）、糖基二酰基甘油（DGDG）和单半乳糖基二酰基甘油（MGDG）,这些独特之处使其具有细胞调节活性，并可以在不同物种间的交流发挥更大作用[1]。常规的PENs样本的制备结果同样需要经过透射电镜、NTA检测等质控项目，这也对其前处理及提取提出了较高要求。
对于葡萄、生姜、苹果等富含汁液的样本，我们可以通过以下方式进行前处理：
图片来源：Asian J Pharm Sci.DOI 10.3389/fpls.2022.1064412
1、取得新鲜样本后，根据样本不同采取多次清洗或去皮步骤。2、利用高速搅拌器（匀浆器）将样本磨碎，过程避免温度过高。
3、将取得的果汁或液体经过1000g 10min、3000g 20min、10000g 60min多次离心，每次取上清，以去除杂质及大颗粒。
4、利用0.45um的过滤器过滤掉液体上清中的杂质，之后便可进行下一步的提取流程。
注：对于茶叶等汁水含量较低的样本，则需要在清洗后在一定体积中的冷PBS缓冲液当中行匀浆，之后再进行过滤操作。
如您也正在或准备开展PENs方面的研究，欢迎您致电4006-166-973交流技术问题或咨询相关产品。
[1] Plant-derived exosome-like nanoparticles and their therapeutic activities. Kim J, et al. Asian J Pharm Sci. 2022.
[2] Isolation of high-purity and high-stability exosomes from ginseng. Jinwoo J, et al. Front Plant Sci. 2023.
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