外泌体实验 bug 多，靠这个方法我提前完成了课题！

外泌体实验真是 bug 多，经历了这么多样本，头秃了，课题进度还是毫无进展！身经百战的大师兄一语点醒梦中人「提取外泌体是有技巧的，要根据样本的不同，选用不同的外泌体提取方法，方能达到事半功倍之效。」在师兄的指导下，我外泌体提取又快又好，课题进度大大提前，下面为大家附上好物分享与提取经验。先领福利，再上干货！
 

组织外泌体提取试剂盒，省时省力质量高

欢迎申请试用装！

1尿液篇

为什么我的尿液样本会天差地别，BCA 浓度差了一百倍？？

可能原因：健康样本，疾病样本，不同的疾病样本，其外泌体丰度差异很大，一定要多准备一些样本。

我的尿液样本提取的外泌体怎么老是有污染，冻存样本外泌体不太多。

可能原因：对于尿液样本来说，会有一定的污染概率，需要提前除菌操作，或者提取外泌体后过纯化 EPF 柱；另外，针对尿液将用于临床检测的需求而言，样本越新鲜提取，越接近实际情况，越有助于提高诊断准确性。

2乳液篇

为什么我的乳液样本提取出来的蛋白浓度这么高？

可能原因：乳液如牛奶外泌体含有丰富的蛋白质，在样本预处理和后续提取过程中需要先去除杂蛋白和脂质；

乳液外泌体粒径比普通的 293T 细胞的外泌体大了好多，是啥原因？

可能原因：乳液中本身外泌体的粒径会偏大；

3血液篇

为什么我的血液有时候提取不到外泌体？粒径也不对？

可能原因：溶血，会导致大部分外泌体破损，加上不同的提取方法外泌体提取效率 15%-40% 左右，又会损失很大一部分，基本上就很难看到外泌体了；也可能是样本冻存太久，外泌体降解了，有时候也是很难提取到外泌体的；

为什么我的血浆样本提取的外泌体沉淀非常的多，而且很粘稠重悬不了？

可能原因：血浆背景比较丰富，含有的杂蛋白比较多，从纯度的角度看，需要先去除杂蛋白，后续的实验才能进一步推进，不过这也会损失一部分得率；

4细胞上清篇

为什么不同细胞外泌体分泌差异很大？同样的方法得到差一个数量级的结果！

可能原因：不同外泌体分泌外泌体用于信息交流的频率不同，分泌的外泌体量差异很大；

不加血清培养的细胞上清外泌体为啥这么少？

可能原因：没有添加血清的情况下，细胞生长所需营养不够，无法产生足够多的外泌体，甚至有的细胞在饥饿情况下会吞噬外泌体，建议用无外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基；

我的外泌体提取浓度很低，无法解决后续实验需求的量和浓度怎么办？

可能原因：不同方法提取外泌体得率差异很大，确实有的方法为了提高纯度会损失很多得率，这个时候可以考虑在前期把上清液做一下浓缩，再优化外泌体浓度，用于后续实验；

5组织篇

组织外泌体为啥我提取出来的都是杂质？

可能原因：组织外泌体提取最大问题是预处理的液化，用诸如胶原酶等，先液化，再过滤，再往后进行，方法差异很大，需要有高分文献支持，否则可能后续提取不到外泌体；

组织外泌体为啥有时候能提取到，有时候提取不到？

可能原因：组织外泌体分泌量根据来源不同，差别也是很大的，建议先找一些样本，做预实验，确保量足够再用于后续的规模化实验。